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什么是人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA Kit
作者：深圳市恒昊生物科技 有限公司
人β干扰素ELISA Kit，全称是人β干扰素酶联免疫吸附检测试剂盒，是基于抗原抗体特异性结合原理开发的成套预包装试剂，专门用于检测血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本中IFN-β的浓度，不需要使用者自行配制所有试剂，开箱即可开展实验，大大降低了实验门槛。
目前市面上绝大多数的人β干扰素ELISA Kit采用双抗体夹心法检测，原理流程如下：
- 试剂盒的预包被板孔已经固定好可以特异性结合IFN-β的一抗（捕获抗体）；
- 加入待测样本后，样本中的IFN-β会和孔中固定的捕获抗体结合；
- 洗去未结合的杂质后，加入生物素标记的二抗（检测抗体），二抗会和已经结合在捕获抗体上的IFN-β结合，形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”的复合物；
- 再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素和链霉亲和素特异性结合，将酶连接到复合物上；
- 加入显色底物（通常是TMB），HRP会催化底物产生蓝色反应，加入终止液后变为黄色，颜色的深浅和样本中IFN-β的浓度成正比，最后通过酶标仪检测吸光度
使用该试剂盒的注意事项
ELISA检测结果的准确性非常依赖操作规范，使用人β干扰素ELISA Kit时，一定要注意这些事项，才能避免结果偏差：
1. 试剂保存与复溶
- 试剂盒一般需要2-8℃避光保存，不能冷冻，否则会导致包被抗体活性丧失，开封后如果没有用完，要将酶标板密封好放回冰箱，避免受潮变质。
- 标准品复溶时要充分溶解，轻轻晃动避免产生气泡，梯度稀释时要充分混匀，否则会导致标准曲线偏差，最终样本浓度计算错误。
- 不同批次的试剂盒组分不要混用，不同品牌的试剂组分交叉使用会导致结果完全不可靠。
2. 样本处理相关
- 采集样本后要尽快处理，血清/血浆样本建议采集后2小时内分离，分装后-20℃或-80℃保存，避免反复冻融，反复冻融会导致IFN-β降解，检测结果偏低。
- 若样本中IFN-β浓度超出标准曲线的最高浓度，需要用样本稀释液稀释后重新检测，否则会出现“钩状效应”，导致定量错误。
- 溶血、高脂血的样本会影响结果，一般不建议使用，如果必须检测，要在结果分析中注明样本状态的影响。
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