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科普人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA Kit说明书

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人人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA Kit

提供商:深圳市恒昊生物科技有限公司

什么是人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)

Ep-CAM是一种分子量约为40kDa的I型跨膜糖蛋白,最初在上皮细胞间粘附连接中被发现,因此得名粘附分子。它的编码基因位于人2号染色体长臂,结构分为胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域三部分:胞外区域负责介导同质性的细胞粘附,胞内区域可参与多条细胞信号通路的调控,影响细胞的增殖与迁移。



除了基础的粘附功能,近年研究发现Ep-CAM还是重要的肿瘤相关标志物:在乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌等多数上皮源性恶性肿瘤中,Ep-CAM会出现异常高表达,且其表达水平和肿瘤的侵袭转移、患者预后密切相关;同时它也是循环肿瘤细胞(CTC)、肿瘤干细胞的重要标记分子,在肿瘤早期诊断、预后评估、疗效监测中都有重要的临床价值,因此精准定量检测样本中Ep-CAM的含量,对基础研究和临床应用都意义重大。

操作过程注意事项

  1. 加样:加样时注意不要触碰孔壁和枪头交叉污染,标准品和样本建议设置复孔,减少操作误差;加完所有样本后可以轻轻拍板,让样本充分混匀,避免加样后液体挂壁。
  2. 洗涤:洗涤是降低背景、避免假阳性的关键步骤,洗涤时要保证每孔都加满洗涤液,每次浸泡30秒到1分钟再拍干,严格按照说明书要求洗涤次数,不要擅自减少洗涤次数。手工洗板结束后要将板在吸水纸上拍干,避免残留洗涤液。
  3. 孵育:孵育温度和时间要严格遵循说明书要求,孵育过程注意密封微孔板,防止液体蒸发,不要在孵育过程中频繁移动微孔板。
  4. 显色:显色过程要避光放置,避免底物自发氧化变色;终止液添加顺序尽量和加底物顺序一致,保证每孔的显色时间一致。

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