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流感病毒(IFV-A)抗体IgM检测试剂盒（酶联免疫法）
作者：深圳市恒昊生物科技有限公司
什么是甲型流感病毒（IFV-A）
甲型流感病毒属于正粘病毒科，是一种分节段的单链负链RNA病毒，根据病毒表面两种关键糖蛋白——血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的抗原性差异，可以进一步分为多个亚型，目前已经发现18种HA亚型和11种NA亚型，常见的可感染人类的亚型包括H1N1、H3N2等。
和其他类型流感相比，甲型流感病毒最显著的特点是抗原变异性极强：病毒在复制过程中很容易发生点突变积累，导致抗原漂移，让原本的疫苗保护力下降；当不同亚型的流感病毒同时感染同一个宿主时，还可能发生基因重配产生全新的毒株，引发抗原转变，这种情况很可能导致易感人群大幅增加，引发区域性甚至全球性的大规模暴发流行。
检测操作流程
该检测一般需要采集受检者静脉血清作为待检样本（部分也可使用血浆），操作步骤大致分为以下几步：
- 试剂准备：检测前将试剂盒从冷藏环境取出，平衡至室温（一般18-25℃），取出所需包被微孔板，未使用的板条放回密封袋密封冷藏保存；按照说明书要求配制好洗涤液、样本稀释液等工作液。
- 样本处理与加样：将待检血清用样本稀释液按要求比例稀释后，加入到对应的微孔中，同时预留阳性对照孔和阴性对照孔，分别加入对应对照品，轻轻振荡微孔板混匀样本。
- 温育反应：将微孔板放入37℃恒温箱中温育，让抗原抗体充分结合，温育时间按照说明书要求控制，一般为30-60分钟。
- 洗板：温育结束后，弃去板内液体，用配制好的洗涤液反复冲洗微孔板数次，洗去未结合的物质，去除非特异性干扰，洗完后拍干残留液体。
- 加酶标二抗：向每个微孔中加入酶标记的抗人IgM抗体，再次放入37℃恒温箱温育，时间一般为30分钟，之后重复洗板步骤。
- 显色与终止反应：向每个微孔加入显色底物，避光条件下室温或37℃显色10-15分钟，之后加入终止液停止反应，颜色会从蓝色转变为黄色。
- 结果判读：使用酶标仪在指定波长（一般为450nm）下读取各孔的OD值，按照说明书设定的判定标准判断结果：通常以cut-off值（临界值）为标准，样本OD值≥cut-off值为阳性，提示存在甲型流感病毒近期感染；样本OD值＜cut-off值为阴性。
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