经方_1区：中南大学湘雅医院揭示血府逐瘀汤通过tRF-3-Leu-AAG/Gpr17轴改善颅脑损伤后的神经炎症

【写在前面】：本期推荐的是由中南大学湘雅医院中西医结合科中西医结合研究所、中南大学湘雅医院中医药跨学科研究中心、中南大学湘雅医院国家老年病临床研究中心等研究团队合作近期发表于Phytomedicine(IF11.3）的一篇文章，揭示血府逐瘀汤通过tRF-3-Leu-AAG/Gpr17轴改善颅脑损伤后的神经炎症。

【期刊简介】

【题目及作者信息】

Xuefu Zhuyu Decoction Ameliorates Neuroinflammation after Traumatic Brain Injury via tRF-3-Leu-AAG/Gpr17 axis

背景

血府逐瘀汤（XFZYD）基于其活血化瘀的传统功能，临床应用于创伤性脑损伤（TBI）。然而，人们对其功效的确切机制，特别是通过表观遗传调控，知之甚少。

研究目的

我们假设XFZYD在TBI后的神经保护作用是通过调节转移RNA衍生的小RNA（tsRNAs）介导的，tsRNAs是一类关键的表观遗传调节因子。本研究旨在描绘XFZYD减轻神经炎症和促进神经恢复能力的特定tsRNA依赖性分子途径。

材料与方法

我们采用了用XFZYD治疗的小鼠TBI模型。在对神经、组织病理学和炎症结果进行全面评估以测试小鼠行为后。在体内和体外研究了tRF-3-Leu-AAG的抗炎症作用。RNA测序和生物信息学分析表明，G蛋白偶联受体17（Gpr17）是tRF-3-Leu-AAG的靶标。tRF-3-Leu-AAG和Gpr17之间的直接相互作用通过双荧光素酶测定得到验证。最后，体外拯救实验最终确定tRF-3-Leu-AAG/Gpr17轴是XFZYD作用的功能途径。

结果

XFZYD给药显著减轻了TBI后的神经功能缺损、神经元损失，并挽救了认知障碍。tRF-3-Leu-AAG是一种关键的介质，被TBI抑制，被XFZYD上调。该研究表明tRF-3-Leu-AAG影响炎症反应。关键的是，XFZYD的抗炎和神经保护作用完全依赖于tRF-3-Leu-AAG。我们通过将Gpr17鉴定为tRF-3-Leu-AAG的直接和功能靶点，进一步描绘了下游信号传导。XFZYD介导的tRF-3-Leu-AAG结合Gpr17 mRNA的3′UTR以抑制其表达，从而抑制Gpr17诱导的促炎途径。

结论

本研究阐明，XFZYD通过tRF-3-Leu-AAG/Gpr17轴在TBI后发挥神经保护和抗炎作用。我们的研究结果为XFZYD治疗TBI的应用提供了现代科学依据。

图文摘要

【前言】

创伤性脑损伤（TBI）是一个主要的全球健康问题，也是全球慢性残疾和死亡的主要原因。其复杂的病理生理学涉及一系列相互关联的细胞和分子事件，其中神经炎症在驱动继发性脑损伤和决定神经功能恢复的预后方面占据核心地位。TBI通过触发驻留小胶质细胞的激活、诱导细胞因子释放和促进外周循环免疫细胞浸润中枢神经系统来引发继发性损伤，从而加剧持续的病理炎症。作为中枢神经系统（CNS）中的主要先天免疫细胞，小胶质细胞作为前线防御群体，在TBI反应中经历快速的功能激活。中度小胶质细胞活化有助于碎片清除和组织修复，但持续和过度的小胶质细胞反应会通过过度分泌促炎介质（包括TNF-α、IL-1β和IL-6）加剧神经元和突触损伤。因此，精确调节小胶质细胞功能状态和抑制不受控制的神经炎症对于减轻TBI后的继发性脑损伤和改善长期预后至关重要。

血府逐瘀汤是一种经典的中药方剂，已被广泛应用于TBI的临床干预。临床前研究证实了XFZYD的神经保护特性，主要是通过其抑制脑损伤后异常神经炎症的能力。我们之前的工作还证实，XFZYD治疗重塑了小胶质细胞的反应性，并抑制了TBI后的神经炎症级联反应，表明其对小胶质细胞功能稳态具有强大的调节作用。值得注意的是，最近的研究表明，XFZYD可以重塑tsRNA表达谱，并在TBI进展过程中介导tsRNA相关的信号通路。我们发现tRF-3-Leu-AAG是TBI后下调的关键介质，XFZYD治疗后显著上调。因此，探索XFZYD调节tRF-3-Leu-AAG重塑小胶质细胞炎症反应的调控机制将有助于进一步阐明XFZYD介导的TBI神经保护的分子基础。

在本研究中，我们证明了tRF-3-Leu-AAG表达的升高有效地抑制了神经炎症，增强了抗炎和稳态标志物的表达，而tRF-3-Leu-AAG的敲除增强了促炎反应，上调了有害的炎症基因表达。体内和体外证据均证实，XFZYD以tRF-3-Leu-AAG依赖的方式改善TBI模型中的神经缺陷并减轻神经炎症。通过转录组测序和生物信息学预测，筛选并鉴定Gpr17为tRF-3-Leu-AAG的核心下游靶点，并通过双荧光素酶报告检测进一步验证tRF-3-亮氨酸-AAG和Gpr17之间的直接结合。从机制上讲，XFZYD上调tRF-3-Leu-AAG以转录抑制Gpr17，从而限制过度的小胶质细胞炎症并促进TBI后的神经组织修复。总之，我们的研究结果表明，XFZYD通过tRF-3-Leu-AAG/Gpr17调节轴减轻TBI后神经炎症并促进神经恢复。

【结果部分】

1.通过LC-MS/MS在正离子模式(A)和负离子模式(B)下分析样品所得代表性总离子色谱图（TICs）。峰鉴定：A，羟基黄花黄A；B，新橙皮苷；C，杏仁苷；D，阿魏酸；E，芍药苷;

2.XFZYD 可减轻创伤性脑损伤（TBI）小鼠的神经功能缺损及脑损伤。

3.XFZYD 通过调节小胶质细胞活化并促进抗炎作用，从而改善创伤性脑损伤（TBI）中的神经元微环境。

4.XFZYD 上调tRF-3-Leu- AAG 的表达水平。

5.tRF-3-Leu-AAG能够抑制神经炎症反应。

6.XFZYD 靶向tRF-3-Leu- AAG 以抑制炎症反应。

7.体内实验证据表明， XFZYD 可通过调节tRF-3-Leu- AAG 来缓解神经炎症。

8.XFZYD 调控的tRF-3-Leu- AAG 靶向Gpr17以抑制神经炎症反应。

【结论与讨论】

总之，本研究阐明了tRF-3-Leu-AAG/Gpr17轴是XFZYD促进TBI恢复的关键机制途径。tRF-3-Leu-AAG的特异性上调，再加上随后Gpr17的下调，是观察到的神经炎症减少和神经功能改善不可或缺的一部分。这些发现为XFZYD的治疗应用提供了直接的分子基础，并将这一新特征轴定位为有前景的靶点。

注：本文原创表明为原创编译，非声张版权，侵删！

中医药基础科研技术服务及加群交流：

相关咨询，加微信：1278317307。

【福利时刻】科研服务（点击查看）：、、、、、。咨询加微信：1278317307。