Veterinary Research | 哈兽研成功研制可同时防控禽偏肺病毒与传染性法氏囊病病毒新型变异株的重组疫苗候选株

近日，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽免疫抑制病创新团队在国际兽医领域权威期刊Veterinary Research在线发表了题为《A new recombinant avian metapneumovirus vaccine candidate provides complete protection against the novel variant infectious bursal disease virus in chickens》的重要研究成果。该研究首次以B亚型禽偏肺病毒（aMPV/B）弱毒株为载体，成功构建了表达新型变异株传染性法氏囊病病毒（nVarIBDV）VP2蛋白的重组病毒rLN16A-nVarVP2，单次免疫即可对两种病毒提供100%的完全保护。

传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的鸡急性、高度接触性、免疫抑制性疾病，对全球养禽业造成严重经济损失。IBDV主要存在经典株、变异株、超强毒株和新型变异株（nVarIBDV）等多种致病型。自2017年以来，nVarIBDV已在我国、日本、马来西亚、韩国等多个国家的免疫鸡群中广泛流行，甚至超越超强毒株成为优势流行毒株。然而，现有针对超强毒株的商品化活疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗对nVarIBDV仅能提供有限保护。因此，研发抗原匹配的新型疫苗已成为防控nVarIBDV感染的迫切需求。

研究团队以实验室前期通过Vero细胞传代致弱获得的aMPV/B弱毒株LN16-A为骨架，在其G基因与L基因之间插入nVarIBDV的主要结构蛋白及宿主保护性免疫原VP2基因，成功拯救获得重组病毒rLN16A-nVarVP2。免疫荧光和Western blotting分析证实VP2蛋白在体外稳定表达。进一步研究表明，VP2基因的插入未影响亲本病毒的复制动力学，且重组病毒在连续传代20次后外源基因表达仍保持稳定。

Figure: Construction and rescue of recombinant avian metapneumovirus subtype B (aMPV/B) vaccine (rLN16A-nVarVP2) expressing the novel variant infectious bursal disease virus (nVarIBDV) VP2 gene

研究团队对14日龄SPF鸡单次接种rLN16A-nVarVP2后系统评估了其免疫效果。在体液免疫方面，免疫后21天抗nVarIBDV中和抗体滴度达2^8.8，抗aMPV/B中和抗体滴度达2^8.6。在细胞免疫方面，免疫组鸡血清中Th1型（IL-2、IFN-γ）和Th2型（IL-4、IL-6）细胞因子水平均显著高于未免疫对照组。上述结果表明，单次免疫可同时诱导针对两种病毒的强烈体液免疫和细胞免疫应答。

在攻毒保护试验中，rLN16A-nVarVP2对nVarIBDV和aMPV/B攻毒均提供100%的完全保护。nVarIBDV攻毒后，未免疫组法氏囊出现严重萎缩、黄变及炎性渗出物，法氏囊指数低于0.7，而免疫组法氏囊未见任何病变；未免疫组法氏囊、肾脏、脾脏病毒载量分别达10^4.5、10^3.1、10^3.5 copies/10^6 cells，免疫组相应器官病毒载量分别降低10^3.3、10^2.7、10^3.2倍。aMPV/B攻毒后，未免疫组于攻毒后6天发病率达100%，鼻裂排毒峰值达10^6.1 copies/mL，而免疫组无任何临床症状，排毒量最大值仅为10^2.4 copies/mL，降低约10^3.7倍。组织病理学分析显示，免疫组法氏囊和鼻甲骨均未见病理损伤，而对照组分别出现淋巴细胞大量缺失和炎性细胞浸润。

Figure: Protective efficacy of rLN16A-nVarVP2 against nVarIBDV and aMPV/B

研究指出，现有针对超强毒株的商品化疫苗因抗原不匹配，无法对nVarIBDV提供充分保护。aMPV作为偏肺病毒属成员，其基因组可稳定容纳外源基因，是理想的疫苗载体。前期研究已证实，弱毒株LN16-A在鸡体内连续传代后关键毒力基因F和G未发生突变，无返强风险。更重要的是，由于rLN16A-nVarVP2以aMPV/B为载体，不会被IBDV特异性母源抗体中和，有望克服传统IBDV活疫苗受母源抗体干扰的难题。该研究是国际上首次以aMPV/B为载体表达nVarIBDV VP2并系统评价其免疫效果的报道。

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所孟令宅博士为本论文第一作者，禽免疫抑制病创新团队首席高玉龙研究员为本论文通讯作者。该研究得到了中国农业科学院青年创新专项（Y2026QC33）、国家肉鸡产业技术体系项目（CARS-41-G15）及中国农业科学院科学中心项目（CAAS-CSLPDCP-202402）的资助与支持。